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流行性脑脊髓膜炎病原学、流行病学、样品采集和运送
2014-12-10 12:34:00   来源:   


B.1  病原学

B.1.1  流行性脑脊髓膜炎的病原菌为脑膜炎奈瑟菌,俗称脑膜炎双球菌,为肾型或豆型革兰阴性双球菌。在患者脑脊液中,多位于中性粒细胞内,形态典型。新分离的菌株大多带有荚膜和菌毛,人工培养后可成卵形或球形,排列不规则。

B.1.2  脑膜炎奈瑟菌的主要致病成分为内毒素,内毒素作用于小血管和毛细血管,引起坏死、出血,出现皮肤瘀点或瘀斑和微循环障碍,严重败血症时,大量内毒素释放可造成DIC及中毒性休克。

B.1.3  荚膜多糖为脑膜炎奈瑟菌特异性抗原,国内外已经分为A、B、C、D、X、Y、2、29E、W135、L等10个血清群,我国建立了H、I、K三个新的血清群,总共有13个血清群。

B.1.4  本菌对环境的抵抗力低,对寒冷、干燥、高温、日光及紫外线都很敏感。化学药剂如1%酚、0.1%升汞、0.1%新洁尔、0.01%杜灭芬、75%酒精等处理很快死亡,脑膜炎奈瑟菌能产生自溶酶,在保护剂中(卵黄盐水柳脱脂奶),特别是传代菌株放置冷暗处自溶酶活力受到抑制,叮延长保存时间,在培养基或保护剂中置1℃~6℃,最长可存活2个月。

B.2  流行病学

B.2.1  传染源

带菌者和患者。

B.2.2  传播途径

病原菌主要借咳嗽、喷嚏、说话等由飞沫直接从空气传播,进入呼吸道引起感染。密切接触对2岁以下婴幼儿的传播有重要意义。

B.2.3  人群易感性

人群普遍易感,发病年龄从2个月~3个月开始,6个月至2岁时发病率最高,以后随着年龄的增长而逐渐降低。易感人群受脑膜炎奈瑟菌感染后,60%~70%成为无症状带菌者,25%表现为皮肤出现瘀点:7%表现为上呼吸道感染,仅l%表现为化脓性脑膜炎。

B.2.4  流行特征

B.2.4.1  地区分布

全球均有流脑发病。A群曾是起世界各地大流行的主要菌群,近十余年来欧美地区流行的主要为B群或C群,近年在非洲发生了W135群的流行。我国流行菌群以A群为主,近年个别地区有C群病例发生。

B.2.4.2  周期性

在流脑菌苗广泛应用以前曾大约3年~5年出现一次小流行,8年~10年出现一次较大流行,流脑菌苗的接种可改变流行的周期性。  

B.2.4.3  季节分布 :全年皆可发生,以冬春季节发病较多。
 
B.3  流行性脑脊髓膜炎的样品采集和运送

实验检出脑膜炎奈瑟菌是流脑的确诊依据,适宜的检测样品为脑脊液、血液、皮肤黏膜瘀点或瘀斑组织液、血清及鼻、咽拭子等,脑脊液、血液、皮肤黏膜瘀点或瘀斑组织液中检出脑膜炎奈瑟菌可直接作为确诊依据。

B.3.1  样品采集

B.3.1.1  咽拭子

用长柄棉拭子采咽后壁两侧分泌物,立即接种于卵黄双抗培养基(EPV)或巧克力羊血平板,也可将咽拭子放入液体双抗增菌管内,增菌8h~12h以后分离培养。

B.3.1.2  脑脊液

采集脑脊液1mL~3mL。可用0.1mL~0.5mL直接接种于巧克力或EPV平板,也可先增菌再进行分离培养。

B.3.1.3  血液

无菌操作抽取发热期患者全血5mL~l0mL,0.1mL~0.5mL直接接种EPV平板,余血立即加于50 mL的葡萄糖肉汤中增菌后再分离培养。采集患者发病早期和恢复期双份血清,检测血清中特异性抗体呈4倍或4部以上升高。

B.3.1.4  瘀点或瘀斑

选患者皮肤上的新鲜瘀点或瘀斑,生理盐水消毒后用针头挑破,挤出组织液,用消毒后的玻片直接蘸取组织掖涂片,革兰染色镜检。也可用无菌棉签蘸取组织液先接种于含双抗的葡萄糖增菌肉汤管中。增菌8h~l2h后分离培养或直接接种EPV平板,再涂片染色直接镜检。

B.3.2  样品的处理和运送

B.3.2.1  样品处理

脑膜炎奈瑟菌比较脆弱,采集样品后,应尽可能地做到床边接种,若无可能则应在最短的时间内送至实验室进行接种培养。

B.3.2.2  早期采集样品

应尽可能采集患者使用抗生素前的早期样品,以提高病原的检出率。

B.3.2.3  保温运送

脑膜炎奈瑟菌对温度较为敏感,温度过低或过高均可导致菌株死亡。在运送样品或培养物时,应保持样品处于25℃~35℃之间,切记不能低温运送(检测抗体的血清标本除外)。

补充:

1、增菌、分离培养条件:35℃、5%二氧化碳培养箱孵育8-16小时。

2、疑似病例不采集咽拭子,只采集脑脊液和全血,不需要抗凝。

3、密切接触者采集咽拭子,直接接种于巧克力平板上后进行孵育。

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